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凱氏定氮儀(yi) 如何測定蛋白質
凱氏定氮儀(yi) 可以檢測和分析食品中蛋白質和氮的含量,在食品質檢部門發揮著重要的作用。下麵為(wei) 大家簡單介紹一下該儀(yi) 器是如何進行蛋白質檢測的。
蛋白質是鑒定飼料質量時必測的常規營養(yang) 指標。而大部分的飼料廠中的飼料蛋白質的測定一般是使用凱式定氮儀(yi) 來進行測定的,使用這種方法來進行測定能夠保證測定的準確度,但是測定的時候會(hui) 花費一定的時間,那麽(me) 在使用凱氏定氮儀(yi) 的時候是如何進行測量的,本文就來進行簡單的介紹一下:
1 樣品處理:精密稱取 0.2~2.0g 固體(ti) 樣品或 2~5g 半固體(ti) 樣品或吸取 10~20mL液體(ti) 樣品(約相當氮 30~40mg),移入幹燥的 100mL 或 500mL 定氮瓶中,加入 0.2g 硫酸銅,3g 硫酸鉀及20mL硫酸,稍搖勻後於(yu) 瓶口放一小漏鬥,將瓶以45°角斜支於(yu) 有小孔的石棉網上。小心加熱,待內(nei) 容物全部炭化,泡沫*停止後,加強火力,並保持質瓶內(nei) 液體(ti) 微沸,至液體(ti) 呈藍綠色澄清透明後,再繼續加熱 0.5h。取下放冷,小心加 20mL 水。放冷後,移入 100mL容量瓶中,並用少量水洗定氮瓶,洗液並入容量瓶中,再加水至刻度,混勻備用。取與(yu) 處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸按同一方法做試劑空白試驗。
2 按圖裝好定氮裝置,於(yu) 水蒸氣發生瓶內(nei) 裝水至約2/3處,加甲基紅指示液數滴及數毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入數粒玻璃珠以防暴沸, 用調壓器控製,加熱煮沸水蒸氣發生瓶內(nei) 的水。
3 向接收瓶內(nei) 加入 10mL2% 硼酸溶液及混合指示液1滴, 並冷凝管的下端插入液麵下,吸取 10.0mL樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應室,並以 10mL 水洗滌小燒杯使流入反應室內(nei) ,塞緊小玻杯的棒狀玻塞。將 10mL40%氫氧化鈉溶液倒入小玻杯,提起玻塞使其緩緩流入反應室,立即將玻塞蓋緊,並加水於(yu) 小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾,開始蒸餾。蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內(nei) ,蒸餾 5min。移動接受瓶,使冷凝管下端離開液麵,再蒸餾1min。然後用少量水衝(chong) 洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以 0.05N 硫酸或 0.05N 鹽酸標準溶液滴定至灰色或藍紫色為(wei) 終點。
凱氏定氮儀(yi) 對蛋白質的測定可以根據上述的方法進行檢測,為(wei) 用戶獲取食物質量的詳情的提供重要的數據信息。
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