稻米直鏈澱粉含量檢測的操作方法

在測定直鏈澱粉含量的實踐中,其關(guan) 鍵步驟在於(yu) 澱粉的溶解,而澱粉的溶解受多種因素影響,如樣品易粘結成團、容器壁殘留樣品、水浴時間與(yu) 溫度的一致性等,從(cong) 而影響測定結果的重複性和準確性。采用標準法測定時,樣品量大,很難控製水浴條件的一致性;體(ti) 積大,不易操作,在酒精分散時易將樣品粘留在容量瓶壁上,容易產(chan) 生誤差;過程複雜,需大量的蒸餾水和較多的其他實驗藥品等。與(yu) 之比較,簡易法不僅(jin) 簡化了步驟,重複性好,節省了藥品,更為(wei) 主要的是用試管架1次可同時沸水浴80個(ge) 樣品,保證樣品間水浴溫度和時間的一致,提高了準確性,兩(liang) 人1d可完成 160多個(ge) 樣品的分析測定,顯著提高了工作效率。因此, 簡易法不僅(jin) 測定結果與(yu) 標準法高度正相關(guan) ,也表現出簡單、、準確,節省樣品和藥品等優(you) 點。因此,育種實踐中,可采用簡易法對育種早世代大群體(ti) 或小樣品進行直鏈澱粉含量的篩選測定。

不同的測定人員在不同時間采用標準法構建的標準曲線,由於(yu) 過程複雜和條件難以控製,一般易出現較大的偏差,每次必須單獨建立標準曲線;采用簡易法建立的標準曲線相互平行,直鏈澱粉含量誤差小於(yu) 2% 。因此,該法建立的標準曲線可供以後測定人員反複使用,無需每次建立標準曲線,減少了工作量。由此可見,技術要求低和易操作性是簡易法另一大特點。

水稻胚乳含70%~80%的澱粉,其中直鏈澱粉含量的變異為(wei) 0%~33%。稻米的加工、蒸煮、食味品質以及澱粉的糊化、膨脹、粘稠、可溶、消化和抗性等澱粉品質的形成與(yu) zui終用途均與(yu) 直鏈澱粉含量和直鏈 P支鏈澱粉的比例有關(guan) 。因此,直鏈澱粉含量一直是重要的水稻品質育種目標之一。在育種實踐中,雖已報道了一些快速測定直鏈澱粉含量的方法,但不是測定時間太長,就是不夠準確和穩定。現行的農(nong) 業(ye) 部米質測定方法(NY147-88),由於(yu) 存在體(ti) 積大和不易操作的問題,不便於(yu) 育種實際利用。因此,為(wei) 在育種實踐中能準確、快速、的測定大量單株或高代品係的直鏈澱粉含量,在農(nong) 業(ye) 部部標方法的基礎上,我們(men) 進行了簡化測定方法的研究。

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