定氮儀等三款儀器對於蛋白質測定分析

    食品中蛋白質含量測定方法多有報導，如凱氏定氮儀(yi) 法、酚試劑法、雙縮尿法、光度法、甲醛滴定法和電流法等，但都存在著操作繁瑣、費時等不足，而且文獻報道基本是采用進口儀(yi) 器，不適合一般實驗室使用。經典的凱氏定氮儀(yi) 法是在食品分析、營養(yang) 和生化研究中廣泛應用的方法，但操作也較為(wei) 繁瑣，耗時較長，作為(wei) 本科學生實驗無法在規定的時間內(nei) 完成整個(ge) 測定過程；同時大量試劑消耗造成資源浪費。
      本文利用控溫消解爐同時可以消解多個(ge) 樣品，利用自動完成加堿、定量蒸餾吸收。自動電位滴定儀(yi) 具有準確度高和自動化程度高的特點。本文測定糧食中蛋白質的含量，對消解條件進行了摸索，並與(yu) 國標法進行了比對。試劑：K2S04；CuS04•5H2O；H2S04；H3B03；NaOH（試劑均為(wei) 分析純）。精稱0.1～0.5g糧食樣品於(yu) 幹燥的消解管中，加入0.3gCuS04•5H20、1.0gK2S04和5mLHzS04搖勻，加熱，消解；待反應液呈藍綠色澄清透明後，繼續加熱10min後取下冷卻至室溫。將上述消解管直接卡於(yu) 凱氏定氮儀(yi) ，將裝有20mL硼酸溶液的錐形瓶置於(yu) 凱氏定氮儀(yi) 吸收架，加堿至液體(ti) 呈棕褐色，蒸餾至凱氏定氮儀(yi) 發出信號後，取下錐形瓶，並置於(yu) 全自動電位滴定儀(yi) ，用硫酸標準溶液滴定，按上述方法考察試劑空白。按照GB／T5009．5-2003方法進行測定Ⅲ。
      實驗考察了樣品量與(yu) 消化劑用量對測定結果的影響，當樣品量為(wei) 0．1～0．5g時；CuSO4、K2SO4和H2SO4試劑用量分別為(wei) 0.39、1.0g和5mL時消解效果zui為(wei) 理想，消解速度快，吸收及電位滴定效果較好，其測定值符合要求。當樣品量過大時，則消解、吸收、滴定效果均不理想。設置不同的消解時間，測定樣品的蛋白質含量。加熱10min的測定值與(yu) 國標法測定值接近。取蛋白質含量不同的4種樣品，分別加標（硫酸銨）回收率實驗，硫酸氨的回收率均在99.0％以上。采用本法與(yu) 國標定氮法分別測定4種樣品蛋白質含量。結果表明，兩(liang) 種方法無顯著性差異（P=0.95）時，量值<2.30，符合要求。取蛋白質含量不同的4種樣品，平行測定5次，相對平均偏差（RSD）均小於(yu) 1.0％，表明該法的精密度良好。
      本方法利用三種儀(yi) 器測量食品中蛋白質的含量，具有較高的準確度和精密度，操作簡便、快速、省時、省力，設備價(jia) 格低，易於(yu) 推廣，且試劑用量少，降低實驗成本，同時也減少了對環境的汙染，這不僅(jin) 能使本科學生在規定時間內(nei) 完成整個(ge) 實驗過程，還可以讓學生在一般基礎實驗室學到、用到較先進的儀(yi) 器。