果汁中總糖的測定方法

糖果—還原糖的測定

1.直接滴定法

2 原理

樣品經除去蛋白質後，在加熱條件下，直接滴定標定過的堿性酒石酸銅液，以次甲基藍作指示劑，根據樣品液消耗體(ti) 積，計算還原糖量。

3 試劑

3.1 堿性酒石酸銅甲液

稱取15g硫酸銅（CuSO4•5H2O）及0.05g次甲基藍，溶於(yu) 水中並稀釋至1000mL。

3.2 堿性酒石酸銅乙液

稱取50g酒石酸鉀鈉及75g氫氧化鈉，溶於(yu) 水中，再加入4g亞(ya) 鐵氰化鉀，*溶解後，用水稀釋至1000mL，貯存於(yu) 橡膠塞玻璃瓶內(nei) 。

3.3 乙酸鋅溶液

稱取21.9g乙酸鋅，加3mL冰乙酸，加水溶解並稀釋至100mL。

3.4 亞(ya) 鐵氰化鉀溶液（10.6+89.4）

稱取10.6g亞(ya) 鐵氰化鉀，加水溶解並稀釋至100mL。

3.5 葡萄糖標準溶液（1mg/mL）

精密稱取1.000g經過98～100℃幹燥至恒量的純葡萄糖，加水溶解後加入5mL鹽酸，並以水稀釋至1000mL。此溶液每毫升相當於(yu) 1mg葡萄糖。

3.6 鹽酸

4 儀(yi) 器

4.1 實驗室常規儀(yi) 器和設備

4.2 古氏坩堝或G4垂融坩堝

5 操作步驟

5.1 樣品處理

將樣品搗碎混勻待用，樣品應避免暴露在空氣和陽光下，並盡可能迅速地進行分析。

稱取約2.5～5g樣品，置於(yu) 250mL容量瓶中，加50mL水，搖勻後慢慢加入乙酸鋅溶液5mL及亞(ya) 鐵氰化鉀溶液（10.6+89.4）5mL，加水至刻度，混勻。靜置30min，用幹燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。

5.2 標定堿性酒石酸銅溶液

吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置於(yu) 150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從(cong) 滴定管滴加約9mL葡萄糖標準溶液，控製在2min內(nei) 加熱至沸，趁沸以每兩(liang) 秒1滴的速度繼續滴加葡萄糖標準溶液，直至溶液藍色剛好褪去為(wei) 終點，記錄消耗葡萄糖標準溶液的總體(ti) 積，同時平行操作三份，取其平均值，計算每10mL（甲、乙液各5mL）堿性酒石酸銅溶液相當於(yu) 葡萄糖的質量（mg）。

5.3 樣品溶液預測

吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置於(yu) 150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，控製在2min內(nei) 加熱至沸，趁沸以先快後慢的速度，從(cong) 滴定管中滴加樣品溶液，並保持溶液沸騰狀態，待溶液顏色變淺時，以每兩(liang) 秒1滴的速度滴定，直至溶液藍色剛好褪去為(wei) 終點，記錄樣液消耗體(ti) 積。

5.4 樣品溶液測定 1

吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置於(yu) 150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從(cong) 滴定管滴加比預測體(ti) 積少1mL的樣品溶液，使在2min內(nei) 加熱至沸，趁沸繼續以每兩(liang) 秒1滴的速度滴定，直至藍色剛好褪去為(wei) 終點，記錄樣液消耗體(ti) 積，同法平行操作三份，得出平均消耗體(ti) 積。

6 結果計算

按下式計算糖果中還原糖的含量： 100100025021×××=VmmX

式中：X—樣品中還原糖的含量（以葡萄糖計），%；

m1—10mL堿性酒石酸銅溶液（甲、乙液各5mL）相當於(yu) 還原糖（以葡萄糖計）的質量，mg；

m2—樣品質量，g；

V—測定時平均消耗樣品溶液體(ti) 積，mL。

7 精密度

同一樣品兩(liang) 次平行測定值相對差不得超過15%。